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简述一下invitrogen胶原蛋白酶的冻干过程
时间:2022-05-23      阅读:278
  invitrogen胶原蛋白酶是一种从白色念珠菌分离出来的强力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的关键试剂。该酶在较广的pH范围(4〜12.5)内及高温(50〜70°C)均有活性,用于质粒或基因组DNA、RNA的分离。在DNA提取中,主要作用是酶解与核酸结合的组蛋白,使DNA游离在溶液中,随后用不同方法进行抽提,除去杂质,收集DNA。EDTA等螯合剂或SDS等去垢剂均不能使之失活。invitrogen胶原蛋白酶贮存液一般为10mg/ml或20mg/ml。贮存于一20°C。invitrogen胶原蛋白酶溶液为无色透明,如出现沉淀就不能再使用。
 
  使用冻干机冻干invitrogen胶原蛋白酶的冻干过程中预冻阶段内温度下降曲线与隔板温度下降曲线基本保持一致,只是其斜率略低。
 
  在一次干燥阶段,样品温度随隔板升温而升温,隔板温度达到预定温度后基本维持不变,而样品温度波动较大,10.5h后样品温度波动幅度逐渐缩小。
 
  在二次干燥阶段,样品温度随隔板上升斜率较一次干燥阶段有所提高,隔板温度达到预定温度后基本维持不变,而样品温度有小幅波动,22h后样品温度逐渐接近隔板温度。
 
  在一阶段和二阶段,冷凝器温度基本维持在-45℃~-40℃,冷凝器在二阶段干燥阶段温度波动比一阶段干燥阶段明显减少。
 
  在预冻阶段内,冻干仓压力下降迅速。在一次干燥阶段的初始阶段(4.0~7.5 h),冻干仓压力随隔板升温而提高;在中间阶段(7.5~12.0h),冻干仓压力波动较大,与样品温度波动有一定的一致性;在结尾阶段(12.0~13.5h),冻干仓压力波动渐趋平静。
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